2017执业药师《药物分析》章节复习:第五章[1]

　　第一节 紫外—可见分光光度法

　　一、基本原理

　　紫外—可见吸收光谱属分子吸收光谱，是由分子的外层价电子跃迁产生的。

　　Lambert-Beer定律 A=ECL

　　A为吸收度，E为吸收系数，C为被测物质溶液浓度，L为光路长度。吸收系数E是物质的物理常数，随浓度C单位的不同有不同表示方法。

　　药品检验中使用百分吸收系数 ，物理意义是当吸光物质溶液浓度为1%(1g/100 ml)，液层厚度为1cm时的吸收度。

　　二、可见-紫外分光光度计

　　光源-单色器-吸收池-检测器-数据记录和处理

　　1.光源：紫外区采用氢灯或氘灯，可见光区采用钨灯

　　2.单色器：狭缝宽度大，单色光纯度差;宽度过小，检测灵敏度降低

　　3.吸收池：玻璃池适用于370nm以上的可见光区，石英池适用于紫外、可见光区，通常仅在紫外光区使用

　　三、吸收度的测定方法

　　1.对溶剂的要求：能充分溶解样品，与样品无相互作用，挥发性小，在测定波长处的吸收应符合要求

　　2.空白对照实验：将溶剂装入参比池，调节吸收度为0，去除溶剂和容器吸收、光散射、反射的影响。

　　3.测定波长确证

　　4.供试品溶液浓度：使吸收度在0.3～0.7范围内。

　　5.狭缝宽度：以减少狭缝宽度时，供试品溶液吸收度不再增加为准。

　　四、应用

　　1.鉴别

　　(1) 对比吸收光谱特征参数：核对供试品溶液λmax、 、A是否符合规定。可同时用几个峰位作为鉴别依据

　　(2) 比较吸收度比值一致性：吸收峰较多时，规定几个波长处吸收度比值作为鉴定标准

　　(3) 对比吸收光谱一致性

　　2.杂质检查

　　药物在紫外-可见光区有明显吸收，而杂质吸收弱;或杂质有明显吸收而药物无吸收，可通过控制吸收度限度来控制杂质量。

　　3.含量测定

　　(1) 对照品比较法：供试品溶液和对照品溶液浓度及测定条件应尽可能一致

　　(2) 吸收系数法：需对仪器进行严格校正和检定

　　(3) 计算分光光度法：通过数学处理消除样品中干扰组分的干扰

　　(4) 比色法：供试品与对照品同时操作
第二节 荧光分析法

　　一、基本原理

　　荧光的产生：此化学物质能从外界吸收并储存能量(如光能、化学能等)而进入激发态，当其从激发态再回复到基态时，过剩的能量可以电磁辐射的形式放射(即发光)。荧光发射的特点是：可产生荧光的分子或原子在接受能量后即刻引起发光;而一旦停止供能，发光(荧光)现象也随之在瞬间内消失。

　　发射荧光的光量子数亦即荧光强度，除受激发光强度影响外，也与激发光的波长有关。各个荧光分子有其特定的吸收光谱和发射光谱(荧光光谱)，即在某一特定波长处有最大吸收峰和最大发射峰。选择激发光波长量接近于荧光分子的最大吸收峰

　　物质的激发光谱和荧光发射光谱，可以用作该物质的定性分析。当激发光强度、波长、所用溶剂及温度等条件固定时，物质在一定浓度范围内，其发射光强度与溶液中该物质的浓度成正比关系，可以用作定量分析。荧光分析法的灵敏度一般较紫外分光光度法或比色法为高，浓度太大的溶液会有“自熄灭”作用，故荧光分析法应在低浓度溶液中进行。

　　二、荧光分光光度计

　　激发光源→激发光单色器→样品池

　　↓

　　发射光单色器→检测器→数据记录处理

　　样品池用低荧光材料制成，四面透光，发射光方向与激发光成直角。

　　三、应用

　　荧光分析可用于鉴别和含量测定。一般采用对照品比较法测定含量，灵敏度高、选择性好，但干扰多、线性范围窄，多用于需要高灵敏度和允许较大变异性的样品分析。

　　第三节 红外分光光度法

　　一、基本原理

　　红外光谱是由分子的振动、转动能极引起的光谱。当用一定频率的红外光照射某物质分子时，若该物质的分子中某基团的振动频率与它相同，则此物质就能吸收这种红外光，使分子由振动基态跃迁到激发态。

　　因此，若用不同频率的红外光依次通过测定分子时，就会出现不同强弱的吸收现象。用T%-λ作图就得到其红外光吸收光谱。红外光谱具有很高的特征性，每种化合物都具有特征的红外光谱。用它可进行物质的结构分析和定量测定。

　　二、红外光谱仪

　　光源-吸收池-单色器-执业药师考试