持家基因和目的基因退火温度相差很大,怎么跑定量PCR啊?

持家基因和目的基因退火温度相差很大,怎么跑定量PCR啊? 内参基因与目的基因的Ct值相差很大是什么原因 什么是持家基因? 做RT-PCR时,上下引物退火温度一定要一样吗?内参条带很亮,为什么没有目的基因? 目的基因怎么检测 PCR基因扩增问题退火温度根据什么判断? 我在扩一基因的全长,设计的一对特异引物退火温度一个47度,一个64度,我该怎么确定退火温度? PCR怎么获得目的基因 怎么将目的基因的检测和鉴定 人类的基因和苍蝇的基因相差多少? 求助巢式PCR退火温度的设定我最近准备做巢式PCR,下游引物用oligo dT,上游用两个基因特异性引物,但上游的两个引物和下游的oligo dT相比,Tm值差了将近10度,这样退火温度怎么设定呢? 请问小鼠的DMC1基因是普通的基因吗?不是特殊基因吧.用该基因设计引物,以CDNA为模板,PCR后只有引物二聚没有目的条带,退火温度做了梯度,还是没有条带.是什么原因呢,我的同事用相同的模板, 目的基因和标记基因有什么不同? 标记基因和目的基因是连在一起的吗?如何用标记基因筛选目的基因载体? 目的基因怎么才能稳定遗传? 目的基因中含不含启动子和终止子 目的基因和运载体结合 构建基因文库的目的和意义?