为什么筛选受体细胞时根据抗性基因而不是目的基因==看来是我的问题没有表述清楚啊。生物选修3里关于基因工程的步骤有5步,第4步是筛选含有目的基因的受体细胞(利用抗性基因即标记
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/30 12:33:32
为什么筛选受体细胞时根据抗性基因而不是目的基因==看来是我的问题没有表述清楚啊。生物选修3里关于基因工程的步骤有5步,第4步是筛选含有目的基因的受体细胞(利用抗性基因即标记
为什么筛选受体细胞时根据抗性基因而不是目的基因
==看来是我的问题没有表述清楚啊。
生物选修3里关于基因工程的步骤有5步,第4步是筛选含有目的基因的受体细胞(利用抗性基因即标记基因),第5步是目的基因的表达。我的意思是,为什么第四步不能用目的基因来筛选符合条件的受体细胞(如通过DNA分子杂交,检验表达产物这些方法)?
为什么筛选受体细胞时根据抗性基因而不是目的基因==看来是我的问题没有表述清楚啊。生物选修3里关于基因工程的步骤有5步,第4步是筛选含有目的基因的受体细胞(利用抗性基因即标记
这里最重要的是要区别基因工程中出现的最后未成功的两种情况.一种是:目的基因导入了受体细胞但却没表达.(目的基因不是只要导入受体细胞就能表达的,它本身的表达要受到一些修饰部位影响).第二种是:目的基因根本没有导入受体细胞.
抗性基因一般是位于运载体上,它属于标记基因.选择运载体时它必需要有合适的标记基因,就是因为标记基因的目的就是通过它判断重组DNA(目的基因和运载体结合的物质)是否导入了受体细胞.(如第4步中,如果表现有抗性,说明重组DNA已经进入了受体细胞,否则受体细胞不会表现出抗性.)
如果导入了受体细胞,最后就要看目的基因是否表达了,此时就是你说的第5步了.看有没有相应的蛋白质或出现相应的性状,甚至用杂交方法看有没有形成相应的mRNA.
这里的抗性基因就是标记基因,一般存在于质粒上,如抗青霉素基因。
在筛选时,可以将受体细胞培养在含有含青霉素的培养基因上,不能生长的就是导入了目的基因的细胞。当然,只有一个这样的基因是不够的,还要有其他的标记基因配合进行筛选。...
全部展开
这里的抗性基因就是标记基因,一般存在于质粒上,如抗青霉素基因。
在筛选时,可以将受体细胞培养在含有含青霉素的培养基因上,不能生长的就是导入了目的基因的细胞。当然,只有一个这样的基因是不够的,还要有其他的标记基因配合进行筛选。
收起