PCR 后酶切,凝胶电泳,EB染色,做的胶是一块胶上左右两个半块,每次右边半块不显色或者特别浅就是我做的胶是一块胶上最左边以及胶的中间各插了一个梳子,酶切后同时点样同时跑胶,为什么每

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/29 23:13:11
PCR 后酶切,凝胶电泳,EB染色,做的胶是一块胶上左右两个半块,每次右边半块不显色或者特别浅就是我做的胶是一块胶上最左边以及胶的中间各插了一个梳子,酶切后同时点样同时跑胶,为什么每

PCR 后酶切,凝胶电泳,EB染色,做的胶是一块胶上左右两个半块,每次右边半块不显色或者特别浅就是我做的胶是一块胶上最左边以及胶的中间各插了一个梳子,酶切后同时点样同时跑胶,为什么每
PCR 后酶切,凝胶电泳,EB染色,做的胶是一块胶上左右两个半块,每次右边半块不显色或者特别浅
就是我做的胶是一块胶上最左边以及胶的中间各插了一个梳子,酶切后同时点样同时跑胶,为什么每次都是左边的那块显色很清楚,右边的那块就不清楚,甚至都没法判断条带是否分开了,有人说可能是因为EB跟DNA跑的方向相反,左边的那块上面跑完后EB更多一些,让我们跑完后泡EB溶液,还是没用.因为要加快速度,所以一定是要两边一起跑,请问有无高手知道什么原因怎么解决啊?我只有5个财富,都给了吧.

PCR 后酶切,凝胶电泳,EB染色,做的胶是一块胶上左右两个半块,每次右边半块不显色或者特别浅就是我做的胶是一块胶上最左边以及胶的中间各插了一个梳子,酶切后同时点样同时跑胶,为什么每
看看胶是否水平,电泳是否水平.我怀疑你胶总是左边高,右边矮.
还有,你的电压太高,跑的时间过长,导致胶过热也是原因之一.不要超过100V,一般1%缓冲液跑15-20分钟足够了.
还有一种情况就是,右边的样本都跑出胶了,你看到的是左边的样本跑到右边的胶里面了,最好每跑5-10分钟看一下,以防跑过的可能

我不清楚你所说的的左边右边是指什么,你的电泳方向是从左边往右边跑的吗?如果是的话,看看电极有没有插反,因为电极反了就会出现你说的那种情况;如果电极没反的话你可先预电泳一段时间试试,如果还不行的话,那你就用别人的电泳槽试试。是从左边往右边跑的,左边和右边等于两块连着没有切割的胶,加的样品不一样,同时跑,可是每次都是左边那块胶里的条带很清楚,右边的就很浅,有是有条带,就是很浅,或者不清晰没法判断结果。...

全部展开

我不清楚你所说的的左边右边是指什么,你的电泳方向是从左边往右边跑的吗?如果是的话,看看电极有没有插反,因为电极反了就会出现你说的那种情况;如果电极没反的话你可先预电泳一段时间试试,如果还不行的话,那你就用别人的电泳槽试试。

收起

“有人说可能是因为EB跟DNA跑的方向相反,左边的那块上面跑完后EB更多一些,让我们跑完后泡EB溶液,还是没用。”
我认为您那个确实是这个原因,但是跑完泡EB没有用,这现象不太对。建议您查询一些关于后染色的资料。我认为有可能是你的操作有问题。要不您就发一个跑完的照片,大家能更好的帮你分析分析。...

全部展开

“有人说可能是因为EB跟DNA跑的方向相反,左边的那块上面跑完后EB更多一些,让我们跑完后泡EB溶液,还是没用。”
我认为您那个确实是这个原因,但是跑完泡EB没有用,这现象不太对。建议您查询一些关于后染色的资料。我认为有可能是你的操作有问题。要不您就发一个跑完的照片,大家能更好的帮你分析分析。

收起

PCR 后酶切,凝胶电泳,EB染色,做的胶是一块胶上左右两个半块,每次右边半块不显色或者特别浅就是我做的胶是一块胶上最左边以及胶的中间各插了一个梳子,酶切后同时点样同时跑胶,为什么每 琼脂糖凝胶电泳实验失败原因?实验首先是用PCR扩增DNA片段,然后用琼脂糖凝胶电泳分析PCR产物的量,结果失败了,EB染色后凝胶上没有出现亮带.请教各位牛人这些步骤里面可能出现问题的在哪里 琼脂糖凝胶电泳过程中为什么要用EB染色? 琼脂糖凝胶电泳问题请问做ISSR-PCR琼脂糖凝胶电泳一般使用多大浓度的胶. 凝胶电泳做好了之后的胶、缓冲液中,能否沾染EB到手上? 琼脂糖凝胶电泳(经EB染色) 不慎 碰触了 该怎么办? 做PCR以后,跑电泳.结果一条带都没有,为什么我们做的是RT—PCR,用的是琼脂糖凝胶电泳 Rt-pcr EB 染色cDNA是什么原因使其在染色后的不到cDNA条带RT-PCR扩增得到的cDNA是什么原因使其在跑电泳之后不出现cDNA条带? 聚丙烯酰胺凝胶电泳跑的水稻PCR产物,为啥如此拖带 怎么去分析PCR扩增后的凝胶电泳图? 溴化乙锭(EB)染色的机理是什么 EB染色的特点和注意事项是什么 DNA凝胶电泳实验中EB的作用?EB即溴化乙锭,DNA诱变剂,作用机理是什么? 聚丙烯胺凝胶可以用EB染吗因为做的是PCR-SSCP,觉得配银染试剂太麻烦,所以想请问可以用EB染吗?如果用EB然在PCR的循环数上有什么要求? 凝胶电泳后EB染色紫外下无条带是怎么回事maker条带也不明显,重新染色条带还是不明显,点样孔没有漏,不知道是什么原因 聚丙烯酰胺凝胶电泳染色银染染什么的 降解的DNA能做PCR吗?我用酚-氯仿抽提的DNA,经凝胶电泳后发现DNA存在降解的情况,请问这样的标本做PCR的话对结果会有什么影响呢? 做RT-PCR扩增后跑琼脂糖凝胶电泳有什么作用?