PCR反应有非特异性扩增怎么办PCR后跑胶,发现有非特异扩增,亮度比目的片段小,该怎么办呢?接下来要做酶切…谢谢!除了切胶纯化外,还有没有别的方法,比如通过调节PCR反应的条件(

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/16 05:12:42
PCR反应有非特异性扩增怎么办PCR后跑胶,发现有非特异扩增,亮度比目的片段小,该怎么办呢?接下来要做酶切…谢谢!除了切胶纯化外,还有没有别的方法,比如通过调节PCR反应的条件(

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PCR反应有非特异性扩增怎么办
PCR后跑胶,发现有非特异扩增,亮度比目的片段小,该怎么办呢?接下来要做酶切…谢谢!
除了切胶纯化外,还有没有别的方法,比如通过调节PCR反应的条件(目的片段309bp)?怎么调节?

PCR反应有非特异性扩增怎么办PCR后跑胶,发现有非特异扩增,亮度比目的片段小,该怎么办呢?接下来要做酶切…谢谢!除了切胶纯化外,还有没有别的方法,比如通过调节PCR反应的条件(
1 提高退火温度;
2 如果你的非特异袋较大,那么减少延伸时间,用15-20S试试;
3 换引物,找到更特异的引物;

提高退火温度

可以将PCR产物全部跑胶,然后将目的片段进行胶回收,再将胶回收产物用琼脂糖凝胶电泳检测一下,一般都能回收到较纯的目的片段。

降低引物浓度,降低dNTP浓度或者缩短延伸时间都行。

PCR后出现非特异性扩增是什么原因? PCR反应有非特异性扩增怎么办PCR后跑胶,发现有非特异扩增,亮度比目的片段小,该怎么办呢?接下来要做酶切…谢谢!除了切胶纯化外,还有没有别的方法,比如通过调节PCR反应的条件( 什么是PCR技术的非特异性扩增? PCR扩增时出现特异性带和非特异性带?我想问什么是特异性带?什么是非特异性带? 如果PCR没有任何扩增产物或产生许多非特异性产物,应如何分析解决 菌落pcr假阳性如图,菌落pcr,2-6道扩增0.9kb目的条带,7-12扩增1.0kb目的条带.7,8道扩增的1.0kb有点偏离,9道为非特异性扩增,12道在1.0kb位置有隐约条带,是否为非特异性扩增?mark跑直线,而条带两端上扬 进行PCR扩增为什么扩不出目的片段?就连非特异性条带也没有,引物与模板分得清清楚楚 PCR扩增中,降低退火温度、延长变性时间对反应有何影响 巢式PCR扩增阴性对照有非特异性扩增第一泳道:第一轮扩增的阳性对照、 第二泳道:阴性对照第三泳道:marker、 第四、五泳道:第二轮扩增的阳性对照第六泳道:用第一轮扩增的阴性对照 PCR后的质粒DNA电泳的泳道上有一长段白色印迹请问是怎么造成的,(是不是非特异性扩增造成的不同长短片段布满了泳道造成的) 巢式PCR,阴性对照出现非特异性扩增问题第一泳道:第一轮扩增的阳性对照、 第二泳道:阴性对照第三泳道:marker、 第四、五泳道:第二轮扩增的阳性对照第六泳道:用第一轮扩增的阴性对 RT PCR实验 结果出现非特异性扩增 图像如果显示?它的原因和图像出现拖尾的原因一样吗? PCR复性温度如何确定为什么要在最后延伸10min?是否有非特异性扩增产物(或引物二聚体),如何消除? pcr扩增后用电泳带扩不出来是怎么回事 pcr技术扩增 PCR扩增过程 小片段DNA(100-200bp)的PCR扩增PCR模板是100bp-200bp的片段,用SSR引物扩增的时候,出现的不是单一的目的带,目的带出现的同时还有许多非特异性扩增条带,有时候就是条带扩不出来,对于小片段模板 在进行PCR时,模板浓度会导致反应的非特异性增加,怎么理解