RT-PCR 一对引物出很多条带各位大侠帮忙看一下第三第四孔都只加了一堆引物为什么出来那么多条带啊,郁闷郁闷,我做的是RTpcr,反转录引物用的是random 9 mers,

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/05 05:48:40
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RT-PCR 一对引物出很多条带
各位大侠帮忙看一下第三第四孔都只加了一堆引物为什么出来那么多条带啊,郁闷郁闷,我做的是RTpcr,反转录引物用的是random 9 mers,

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1.引物设计不够特异,检查你的序列,去BLAST看看.
2.退火温度过低,检查你的引物的Tm,检查你的程序设置.

引物设计有问题,这是最可能的原因。先把你的引物序列BLAST一下看看。

有可能是污染,以前我也碰到过类似问题。

RT-PCR 一对引物出很多条带各位大侠帮忙看一下第三第四孔都只加了一堆引物为什么出来那么多条带啊,郁闷郁闷,我做的是RTpcr,反转录引物用的是random 9 mers, RT-PCR只有引物二聚体而没有目的条带怎么办?我已经重新设置引物了 PCR无法P出目的条带最近在做PCR,提取的基因组为模板,基因组序列上从NCBI上找的,没有错.但是无论如何换引物和PCR条件,都会得到一条比目的片段大500bp左右的亮条带.(引物换了很多对儿,卡的 细菌基因组DNA 的PCR扩增问题我提取了革兰氏阴性菌的基因组DNA并用几种不同的引物对其进行PCR扩增,意在扩增一段特定的基因片段,其中一对引物扩增出了两条带,一条500bp左右,为目的条带,另 一个引物PCR扩增出的多个条带为什么亮度会不同?用ISSR标记分析遗传多样性,一个引物的PCR扩增结果可以有多个条带,为什么有的条带很亮,有的条带就不太亮? 根据RNA序列设计的RT-PCR一对引物中为什么有一个同源引物,一个互补引物呢? PCR只有引物二聚体的条带,没有目的基因条带 rt pcr的引物设计 做RT-PCR时,上下引物退火温度一定要一样吗?内参条带很亮,为什么没有目的基因? 土壤细菌总DNA pcr模板量一般多少?小弟新手,最近提取土壤细菌总DNA,pcr一直P不出条带,我感觉多数是模板的问题,请各位大侠们指点一下,一般模板量是多少? 最近在做实验RT-PCR,我做RT-PCR,一对引物Tm值分别是52.2,54.6.目的片段1062,PCR反应条件怎么设置呀 普通PCR 为什么只有引物二聚体没有目的条带? 做PCR时引物过量会产生什么样的条带 RT-PCR产物电泳结果只有引物二聚体,没有目的条带,更换引物了也这样,最近2个月反复做PCR跑电泳一直都是只有引物二聚体没有目的条带,我的PCR条件是这样的模板1ul (浓度100ng)引物上下游各1u RT-PCR产物电泳结果只有引物二聚体,没有目的条带,更换引物了也这样,最近2个月反复做PCR跑电泳一直都是只有引物二聚体没有目的条带,我的PCR条件是这样的模板1ul (浓度100ng)引物上下游各1u PCR引物的成分是什么RT 如何设计RT-PCR引物呢,请大侠们帮忙,说具体一些.新手,底子较弱! RT-PCR的引物如何设计?本人刚接触RT-PCR,需要从其它几个物种基因的保守序列中,设计出另一个物种这个基因RT-PCR引物,但是实在是一头雾水,