为什么PCR产物末端有A?

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/12 11:53:32
为什么PCR产物末端有A?

为什么PCR产物末端有A?
为什么PCR产物末端有A?

为什么PCR产物末端有A?
因为PCR用的DNA聚合酶无5 ' 到 3 ‘外切酶的活性,校对功能较差,而具备在dNTP过量时,在产物末端添加A,故PCR产物末端有A,若扩增PCR产物较长,需要高准确率时,采用高保真酶,末端不加A
而高保真酶扩增产物要连TA克隆时,可加入Taq酶,在产物末端加A
因为一般PCR采用的是Taq酶扩增,产物末端都有A

Taq酶自动加上的。用高保真酶就没有。

是和用来进行PCR的酶有关,一般用的普通Taq酶(如Takara 的 rTaq)没有3‘-5’校正功能,有了部分末端转移酶(A,T)的活性,所以PCR产物末端一般有个A;
但是用高保真的酶如pfu等,PCR产物末端没有A

为什么PCR产物末端有A? PCR的产物3末端有A 而T载体的3末端有T.都是3末端,怎么连接上呢? 高保真酶,PCR末端加A原理Takara的高保真酶,exTaq,有3‘-5’外切活性,说明书上又说能在pcr产物末端加A,什么原理呢?是不是在里面混了普通taq酶? PCR时产物末端加A,A加在3’端还是5’端? 具有3'到5‘外切活性DNA聚合酶的PCR产物不能用末端加A尾活性连到T载体上吗 想问下:经Taq DNA聚合酶扩增后的PCR产物末端都带有单个A,这句话怎么解释啊, 有的聚合酶在PCR产物的3,末端可以接上碱基A,易于与T载体连接,请问载体上的T碱基位于哪个末端?如果也位于3,端,似乎他们两个连不上啊 PCR产物跑电泳为什么跑不出孔, 以pcr产物为模板 进行测序pcr NaAc edta 无水乙醇纯化后有很多白色沉淀 为什么? PCR加A的问题做PCR时,3`末端加几个A? Taq DNA聚合酶问题Taq DNA聚合酶具有扩增效率高和错配率低的优良性能,使用该产品扩增得到的PCR产物的3’末端附有一个'A'碱基,请问如何产生的? 在做荧光定量PCR时,PCR仪检测不到荧光信号,但是产物用琼脂糖电泳后有清晰的目的条带,请问这是为什么? 关于平末端DNA加A的一些问题~刚刚学做克隆,看到网上有两种平末端DNA加A尾方法,一种是切胶回收后加,另一种是直接加在PCR产物中,想请问:1.第二种加A方法,加Taq酶和dNTPs了,还要不要加buffer~2. PCR产物电泳大小与实际测序不符,为什么? 荧光定量PCR的扩增产物长度为什么不能太长? 同一基因的PCR扩增的产物为什么不一样? 关于pfu酶扩增PCR产物在做PCR时,用pfu聚合酶扩增出来的产物都是平末端的吗?就是说不管引物序列5'端加的的酶切位点是平末端的还是粘性末端的,只要是用pfu聚合酶扩增出来,那么产物都是平末 刚刚学做克隆,看到网上有两种平末端DNA加A尾方法,一种是切胶回收后加,另一种是直接加在PCR产物中,想请问:1.第二种加A方法,加Taq酶和dNTPs了,还要不要加buffer~2.是在PCR 72度延伸时暂停加效果