PCR 产生比目的片段小的片段,这是怎么回事,怎么样处理?PCR扩增时,电泳后发现的得到的片段远远小于目的片段.目的片段曾今扩增出来过?这是什么原因,怎么样处理 .

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/05/09 19:03:23

PCR 产生比目的片段小的片段,这是怎么回事,怎么样处理?PCR扩增时,电泳后发现的得到的片段远远小于目的片段.目的片段曾今扩增出来过?这是什么原因,怎么样处理 .
PCR 产生比目的片段小的片段,这是怎么回事,怎么样处理?
PCR扩增时,电泳后发现的得到的片段远远小于目的片段.目的片段曾今扩增出来过?这是什么原因,怎么样处理 .

PCR 产生比目的片段小的片段,这是怎么回事,怎么样处理?PCR扩增时,电泳后发现的得到的片段远远小于目的片段.目的片段曾今扩增出来过?这是什么原因,怎么样处理 .
你两次实验的PCR模板是否同一个样本?如果是同一个样本,那就说明你的PCR试剂或者引物有问题,更换
如果不是同一个样本,就再做一次实验
把曾经扩增出目的片段的那个DNA或cDNA样本,现在扩增片段小于目的片段的样本,两个样本一起再做一次PCR,比较一下结果就知道了.
如果两个都做不出来说明你的引物或者PCR试剂有问题
如果第一个做出来,第二个做不出来,那就是第二个不表达这个基因或者表达量很低.

1. primer problem. Unspecific amplification. Redesign.
2. Optimize PCR condition
3. Sequenced that little band see whether it's your problem or the database problem.

引物选错了？

前后所用的PCR试剂是不是都一样？如果一样那可能是引物的问题。
扩增得到的片段很小，那可能是引物二聚体，重新设计引物或者改善一下PCR反应体系中的一些离子浓度等，或改变一下退火温度。
试试热启动PCR或降落PCR来扩增目的片段

PCR 产生比目的片段小的片段,这是怎么回事,怎么样处理?PCR扩增时,电泳后发现的得到的片段远远小于目的片段.目的片段曾今扩增出来过?这是什么原因,怎么样处理 . PCR杂带太亮怎么回收目的片段是RNA剪接的问题吗?做转染或者感染的同仁们,想请教下你们有碰到过这样的问题吗,就是转完基因后,RT-PCR检测发现目的片段要比先前转进去的质粒DNA片段小,提了细胞的DNA出来跑PCR,片段和质粒大家好,问一个不能等到台面上的问题：目的基因片段是扩增片段吗?什么是RT-PCR的目的基因片段,谢谢 pcr扩出目的片段及引物二聚体,pcr反应能扩出我的目的片段,但同时最下面也能看到严重的引物二聚体,这是怎么回事?是引物量加多了吗?结果可靠不 PCR反应有非特异性扩增怎么办PCR后跑胶，发现有非特异扩增，亮度比目的片段小，该怎么办呢？接下来要做酶切…谢谢！除了切胶纯化外，还有没有别的方法，比如通过调节PCR反应的条件（小片段DNA（100-200bp）的PCR扩增PCR模板是100bp-200bp的片段,用SSR引物扩增的时候,出现的不是单一的目的带,目的带出现的同时还有许多非特异性扩增条带,有时候就是条带扩不出来,对于小片段模板 PCR扩增出目的片段之后为什么要酶切?酶切下来的是目的片段和载体?然后再把它们连起来?很困惑. 关于PCR的扩增问题您好,请问你的1200bp的目的片段,后来是怎么调整反应体系,得到结果的? 大侠们,我现在做PCR,用的是师姐设计的引物序列,怎么才能知道目的基因片段的大小 pcr扩增目的片段时,在第几个循环后才能出现目的片段长度的双链DNA分子? PCR技术的结果为在短时间内形成大量的DNA片段,请问这些DNA片段就是目的基因吗?如果是那他们怎么进入质粒,再导入受体细胞? 我的目的片段连T载体后,挑单克隆摇菌,用菌液PCR能P出目的片段,再提质粒用Ecor1做酶切,片段变小怎么回 pcr为什么要扩增,PCR的目的是获得目的基因片段?但为什么要扩增很多次呢,小菜题不懂.为什么要大量呢小片段DNA的PCR扩增程序我要扩的DNA片段138KB扩了很多次都没有扩出来,想问问大家,谁扩过这么小的片段,PCR程序是怎么设定的本人要扩增的是138bp的小DNA,怎么也扩不出来,不知道该怎么办.我的上质粒双酶切后,目的片段DNA是小片段,才56bp,我做的琼脂糖电泳图目的条带看不到,这么小能不能看到呢?如果因片段太小电泳看不到,那么怎么判断小片段被切下来了呢? 胶回收：雀式pcr第一对pcr引物扩增后 ,产物电泳得到两条带,那么我该切哪一条啊?怎么知道目的片段的bp?不是目的片段的bp，图片中左边第一条是marker，第五第六条各有两条带，在1000 和1400的 PCR产物引物二聚体严重,目的片段很淡,怎么解决啊?